CAR-T细胞疗法的药效与安全性

CAR-T细胞疗法的药效与安全性

近年来，CAR-T细胞疗法治疗血液恶性肿瘤成为细胞治疗的一项重大突破。迄今为止，美国食品和药物管理局（FDA）已经批准了六种CAR-T疗法，用于治疗非霍奇金淋巴瘤、B细胞急性淋巴细胞白血病和多发性骨髓瘤。自2017年推出Kymriah以来，CAR-T市场在2021年已增长至17亿美元，预计到2026年销售额将达到75亿美元，年增长率约为33%。到2033年，CAR-T疗法的使用将增加10%，研发工作将主要集中在开发下一代CAR-T疗法。CAR-T疗法已成为当今最火热的免疫治疗之一，也是近十年来免疫医学的重大突破。

图1CAR-T疗法的潜在治疗领域^[1]

CAR-T细胞疗法主要有以下“四更”技术优势：

治疗更精准。由于CAR-T细胞是应用基因修饰病人自体的T细胞，利用抗原抗体结合的机制，能克服肿瘤细胞通过下调MHC分子表达以及降低抗原递呈等免疫逃逸，让肿瘤细胞无所逃遁；

靶向更精准。CAR-T既可以利用肿瘤蛋白质抗原，又可利用糖脂类非蛋白质抗原，扩大了肿瘤抗原靶点范围，CAR-T细胞作用过程不受MHC的限制；

杀瘤更广泛。鉴于很多肿瘤细胞表达相同的肿瘤抗原，针对某一种肿瘤抗原的CAR基因构建一旦完成，便可以被广泛利用；

药效更持久。新一代CAR-T结构中加入了促进T细胞增殖与活化的基因序列，能保证T细胞进入体内后还可以增殖，CAR-T细胞具有免疫记忆功能，可以长期在体内存活。

如今，CAR-T细胞已经被广泛应用于各种肿瘤的细胞免疫治疗中。针对外国市场，据统计，包括美国FDA在内的多个国家药监部门已经批准了多达300余项CAR-T细胞治疗产品推进至临床研究。目前，诺华（Novartis）在CAR-T领域处于领先地位，其主要对手为JunoTherapeutics、凯特药业（KitePharma）、蓝鸟生物（Bluebirdbio）、新基（Celgene），辉瑞等。近日，诺华进一步加大CAR-T领域投资，与英国牛津生物医药（OxfordBioMedica）签署一笔9000万美元的合作协议，进一步扩大双方在CAR-T领域的合作。

针对国内市场，截至2023年12月，国内已获批上市4款CAR-T产品（表1），分别为合源生物-纳基奥仑赛注射液（CD19），复星凯特-阿基仑赛注射液（CD19）、药明巨诺-瑞基奥仑赛注射液（CD19）以及驯鹿生物-伊基奥仑赛注射液（BCMA）。

表1国内上市的CAR-T产品

CAR-T疗法无疑为癌症治疗带来新希望，然而，这种疗法也有严重不良反应。其中，最需要克服的就是CAR-T脱靶问题。CAR-T细胞只有对肿瘤表面抗原进行特异性识别，才能确保其仅攻击肿瘤细胞而不对正常组织造成损伤。因此，如何在保证疗效的同时规避安全性问题，成为我们不得不关注的重要议题，如何鉴定CAR-T的特异性，如何尽早地预估CAR-T的脱靶风险是解决其毒副作用的关键环节。近年来，在脱靶评价技术中崭露头角，人质膜蛋白（plasmamembraneprotein：包括单次跨膜、多次跨膜、GPI锚定蛋白以及离子道通和转运蛋白等）通常会折叠成构象复杂的结构锚定在质膜上，继而发挥离子运输、细胞间相互作用、受体介导的信号转导、酶促反应和免疫识别等重要生物学功能，是重要的药物研发靶点，抗体药或细胞治疗药物的脱靶分析都逃不开对膜蛋白的研究。因此，将所有的质膜蛋白分别表达在工具细胞系表面（通常为HEK-293T），让其保持结构完整性和天然的翻译后修饰，形成包含多种膜蛋白的不同细胞阵列，之后将待检分子与其孵育结合，通过一定的标记方法明确待检分子特异性，这便是人质膜蛋白阵列技术的基本原理，相较于其他脱靶分析方法，膜蛋白阵列具有更高的灵敏度与通量，因为其是在蛋白层面对候选分子（抗体、）的脱靶可能性进行筛选，故能够直接找出与待检分子有结合的具体蛋白，为药物的研发策略提供更有效的指导支持。

图2国产化人质膜蛋白阵列平台的优势

但对于国内研究者而言，使用人质膜蛋白阵列技术曾经并不友好，因为检测费用高昂、样本运输复杂以及反馈及时性等问题显得十分不便，这均是苦于没有一款国产化的技术平台，现如今，科技有限公司弥补了国内市场在新药脱靶评价领域的空白，打造了具有自主知识产权的人质膜蛋白阵列技术平台，完成了国际同行间技术方法的一致性评价，在质粒库容方面，6000+的蛋白库容除了包含各种类型的人质膜蛋白外，还收录了功能性分泌蛋白，从而扩宽了技术平台的应用场景。在质量控制方面，技术平台在载体设计、构建，工具细胞库搭建及高通量瞬时转染等环节均设置严格的质控参数，确保构建cDNA的质粒准确无误，确保工具细胞中能正确表达具有天然构象和翻译后修饰的质膜蛋白，确保通过高灵敏度高通量的化学发光检测技术与流式技术，能准确鉴定抗体、药物或其他配体与质膜蛋白间的靶向特异性。目前已有合作伙伴通过提交守衡生物的人质膜蛋白阵列报告，成功完成IND申报获得了CDE默示许可并开启临床研究。

目前守衡生物已和多家头部生物医药公司建立了战略合作关系，根本解决了样品国外送检时间久，沟通成本高等一系列问题，助力国内研发团队的新药研发进程和加速IND申报，减少在研发和临床实验中的资金投入风险。

关于守衡生物
守衡生物是⼀家专注于抗体特异性分析领先解决方案的生物技术公司，自2019年成立以来，通过自主构建6000+膜蛋白质粒，建立了自动化、高通量检测平台，创建了数据可视化、可追溯质量体系，打造出国际领先的蛋白特异性验证平台---人质膜蛋白阵列平台，能提供“⼀站式、⼀体化”的蛋白非特异性筛选服务；特异性验证平台涵盖了5大功能模块，5个子平台，为药物安全性评估提供系统的解决方案，为病毒机制研究提供理论依据，为配受体脱孤提供科研思路，为小分子药物开发提供设计支撑，为靶点发现提供新的可能。

参考文献

[1]图片来源于https://www.thepaper.cn/newsDetail_forward_24057781

[2] ORLANDOEJ, HAN X, TRIBOULEY C, et al. Genetic mechanisms of target antigenloss in CAR19 therapy of acute lymphoblastic leukemia[J]. Nat Med,2018, 24(10): 1504-1506.

[3] RODRIGUEZ-GARCIAA, PALAZON A, NOGUERA-ORTEGA E, et al. CAR-T cells hit the tumormienvironment: strategies to overcome tumor escape[J]. FrontImmunol, 2020, 11: 1109.