In vivo CAR-T革命背后的“安全守门人”

前言

In vivo CAR-T是一种无需体外细胞操作，直接在患者体内将自身T细胞改造为CAR-T细胞的创新疗法，核心是通过病毒载体、mRNA/LNP、转座子等靶向递送系统将 CAR 编码基因导入内源性T细胞，原位完成CAR的表达与功能激活。与传统的ex vivo CAR-T相比，规避了流程复杂，成本高，周期长等痛点。

图1： Ex vivo CAR-T细胞治疗与In vivo CAR-T细胞治疗

一、In vivo CAR-T完整作用流程：

1. 系统给药与靶向富集：

将携带CAR编码序列的靶向载体（如mRNA-LNP、靶向慢病毒）通过静脉注射入体内；载体通过表面配体/抗体特异性结合外周血、脾脏或淋巴结中的T细胞，减少肝脏等非靶器官的富集。

2. 内吞与基因/RNA释放：

T细胞表面受体与载体结合后，通过受体介导的内吞形成内体；mRNA-LNP通过质子海绵效应破坏内体膜，mRNA进入胞质；慢病毒则通过包膜融合释放RNA并逆转录为DNA，整合至T细胞基因组。

3. CAR表达与功能装配：

mRNA直接在核糖体翻译为CAR蛋白，经内质网/高尔基体加工后转运至T细胞膜；DNA载体则通过转录翻译过程表达CAR，实现持久表达。

4. CAR-T细胞活化与杀伤：

4.1：CAR识别并结合肿瘤细胞表面抗原（非MHC限制性）

4.2：胞内CD3ζ与共刺激信号协同激活T细胞，启动增殖、细胞因子（IFN-γ、TNF-α）分泌和细胞毒性（释放穿孔素、颗粒酶）

4.3：杀伤肿瘤细胞后，CAR-T细胞进一步增殖并形成记忆T细胞，实现长期免疫监视

图2： 基于病毒载体递送平台和脂质纳米颗粒载体递送平台示意图

二、In vivo CAR-T的核心优势：

1. 大幅降低治疗成本，实现规模化生产

In vivo CAR-T采用标准化的载体制剂（如mRNA-LNP、靶向慢病毒），可批量生产，无需针对单个患者进行体外细胞处理，显著降低生产成本，更易普及到普通患者。

2. 缩短治疗周期，适用于急症患者

In vivo CAR-T可直接静脉注射给药，数天内即可完成体内T细胞改造并启动抗肿瘤效应，能快速响应急症患者的治疗需求。

3. 适用人群更广，覆盖T细胞功能缺陷患者

In vivo CAR-T可直接利用患者体内残存的T细胞，甚至能改造肿瘤浸润T细胞，突破了体外CAR-T的适用人群限制，惠及老年患者、多次治疗后复发的患者。

4. 避免体外扩增导致的T细胞功能耗竭

In vivo CAR-T直接在体内生理环境下改造T细胞，保留了T细胞的天然表型和功能多样性，包括初始T细胞和记忆T细胞的比例，更有利于长期免疫监视。

三、In vivo CAR-T的安全性风险：

当行业将目光聚焦于如何在体内更加高效地改造CAR-T细胞时，一群科学家正在追问一个更根本的问题：因体内递送与基因编辑的双重复杂性，in vivo CAR-T的脱靶效应相较传统CAR-T更具挑战，那么我们该如何保证其安全性？

脱靶毒性——免疫疗法最致命的潜在风险。In vivo CAR-T跳过体外制备的严格质控，直接体内编程，安全性的不确定性会呈指数级增加。

传统的体外CAR-T疗法，其安全性评估有一道天然“缓冲带”：在细胞回输前，科学家有充足的时间在实验室里对这批“活细胞药物”进行全面的质量控制和安全性验证，而in vivo CAR-T，将这一过程完全颠覆。

，作为药物安全性评价中脱靶检测的专注者，正站在这一技术浪潮的关键隘口。作为一家专注于分子特异性分析的生物技术企业，其核心业务围绕 () 展开，为CAR-T、抗体药物等研发提供脱靶风险评估与特异性验证解决方案。

图3：高通量检测示意图

人质膜蛋白阵列平台是通过在293T细胞上瞬转6000+膜蛋白形成细胞阵列，在细胞阵列中先通过阳性对照来确定最适样本孵育浓度，后通过高通量、高灵敏度的化学发光检测进行初筛，在特定的检测标准下判断疑似结合蛋白，再对疑似结合蛋白进行表达，分别孵育4个不同浓度梯度的待测样品进行流式细胞检测，来确定蛋白间的结合关系，整个检测过程均设不同质控节点，同样检测过程及数据均可追溯，检测数据报告可应用于IND申报，待检的样品涵盖了不同蛋白标签下的IgG、、ADC、VHH、CAR分子、病毒、小分子、肽等等。

守衡生物虽不直接研发in vivo CAR-T产品，但其核心技术平台精准解决了 CAR-T（尤其是in vivo CAR-T）最关键的安全风险之一：脱靶毒性的评估难题。我们坚信，对脱靶效应极致的、前瞻性的探究，不是给创新“踩刹车”，而是为革命性的疗法“装上了精准的导航和可靠的安全带”。我们不仅是检测服务提供者，更是与创新药企并肩的风险共研伙伴。

关于我们

守衡⽣物是⼀家专注于抗体特异性分析领先解决⽅案的⽣物技术公司，通过⾃主构建6000+膜蛋⽩质粒，建⽴了⾃动化、⾼通量检测平台，打造出国际首家人质膜蛋白阵列技术平台，能提供“⼀站式、⼀体化”的蛋⽩⾮特异性筛选服务；为药物安全性评估提供系统的解决⽅案。

守衡生物目前完成了多例已上市的单克隆抗体脱靶性研究，提供的检测数据报告已进行了IND、FDA申报，从而解决样品国外送检时间久，沟通成本高等一系列问题，助力研发团队的研发进程和IND申报加速，减少在研发和临床实验中的投入风险。