In vivo CAR-T 研发提速，脱靶检测成非临床研究核心关键

前言

嵌合抗原受体（CAR）T 细胞疗法在治疗复发或难治性血液癌症方面效果显著，但目前主流的 体外生产 CAR-T 细胞方法制备过程复杂、成本高昂。近年来，体内 CAR-T 细胞工程技术成为研究热点，该技术主要是通过靶向递送系统，如工程病毒载体、脂质纳米颗粒和聚合物纳米载体，选择性地将CAR基因递送到患者体内的T细胞中，在体内生成 CAR-T 细胞。与体外CAR-T疗法相比，该技术省去了体外制备流程，节约了大量时间及经济成本。但目前In vivo CAR-T仍然面临着许多挑战，如递送效率、靶向特异性、安全性、疗效持久性等。

图1：体内CAR-T疗法示意图

CDE最新发布的《In vivo CAR-T研究进展及非临床一般考虑》中，系统梳理了这一创新疗法的技术发展与非临床研究要求，明确指出脱靶毒性评估是 in vivo CAR-T 研发过程中不可忽视的核心环节，而正是解锁这一关卡的关键手段。

为什么In vivo CAR-T，非做MPA检测不可？

在《In vivo CAR-T研究进展及非临床一般考虑》的指引下，MPA检测的必要性被进一步明确，核心原因集中在3点，每一点都直接关联合规与研发效率：

1. 脱靶风险防控需求：In vivo CAR-T需在体内原位转导T细胞，CAR-T 一旦回输体内，会持续扩增、长期存活。CDE 在指南中明确强调，in vivo CAR-T 的非临床研究需充分暴露脱靶毒性风险 —无论是病毒载体的非靶细胞转导、LNP 载体的组织非特异性递送，还是 CAR-T 细胞的非特异性靶向，都可能引发细胞因子释放综合征（CRS）、神经毒性（ICANS）甚至致癌性风险，成为其临床转化的重要阻碍。MPA可提前全面筛查，规避临床阶段的安全风险。

2. 传统方法局限性：常规TCR（组织交叉反应）试验仅能覆盖少量组织靶点，弱脱靶不能完全识别，但是体内真实风险往往来自于弱亲和力脱靶、未知同源蛋白、低丰度但关键器官的。TCR 是定性、看染色、主观性强，弱结合基本看不见。MPA兼具高灵敏度、高特异性、多维度覆盖的特点，可高通量扫描6000+人源膜蛋白，实现“无死角”排查，采用流式检测能够定量，弱结合也能精准检出，更贴合体内真实的结合场景。

图2：流程

3. 合规申报硬性要求：无论是CDE还是FDA，均明确要求In vivo CAR-T非临床阶段需验证抗原识别特异性，MPA检测结果可直接作为成药性筛选与IND申报的核心依据，助力申报流程顺畅推进。

体内脱靶最关键的问题：它会伤哪里？为什么伤？能不能改？只有MPA能给出：脱靶蛋白名称、组织分布（脑、心、肝、肺、肾…）、结合强度……这是评价体内安全性、解释临床前 / 临床毒性的唯一依据。因此，MPA是 in vivo CAR-T候选分子优选的有利工具。

In vivo CAR-T非临床+MPA检测，这些要点要记牢：

结合《In vivo CAR-T研究进展及非临床一般考虑》要求，MPA检测需紧扣研发实际，重点关注4个核心要点，确保检测结果贴合申报需求：

1. 检测对象聚焦：重点针对/CAR结合域开展MPA检测，核心验证CAR分子的靶点专一性，避免因结合域非特异性导致的脱靶；

2. 试验体系互补：将MPA检测与TCR、体外杀伤、细胞因子释放等试验结合，形成完整的非临床安全性评价链；

3. 结合载体特性：考虑LNP/病毒载体的递送效率与表达特点，评估载体递送后CAR分子的表达水平及交叉反应风险；

4. 助力候选优选：利用MPA检测结果，筛选特异性强、脱靶风险低的候选分子，从源头降低临床研发风险。

当前，In vivo CAR-T研发进入提速期，非临床安全性评价的规范性直接决定IND申报的成功率。《In vivo CAR-T研究进展及非临床一般考虑》的发布，进一步明确了MPA检测在抗原识别特异性评价中的核心地位——它不再是“可选项目”，而是保障研发合规、降低安全风险的“必做项目”。对于研发企业而言，早开展MPA检测，就能尽排查脱靶分子从而更好的进行优化，让In vivo CAR-T的非临床研究更高效、更合规，为后续临床申报筑牢基础。

关于我们

守衡⽣物是⼀家专注于抗体特异性分析领先解决⽅案的⽣物技术公司，通过⾃主构建6000+膜蛋⽩质粒，建⽴了⾃动化、⾼通量检测平台，打造出国际首家平台，能提供“⼀站式、⼀体化”的蛋⽩⾮特异性筛选服务；为药物安全性评估提供系统的解决⽅案。

目前完成了多例已上市的单克隆抗体脱靶性研究，提供的检测数据报告已进行了IND、FDA申报，从而解决样品国外送检时间久，沟通成本高等一系列问题，助力研发团队的研发进程和IND申报加速，减少在研发和临床实验中的投入风险。